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Description: 单细胞 RNA 测序 (scRNA-seq) 为准确理解基因表达调控机制提供了前所未有的能力。然而,scRNA-seq 研究在植物中存在局限性,因为需要酶消化各种植物组织的细胞壁,原生质体分离困难。为了克服这个问题,我们开发了一种不依赖荧光激活细胞分选 (FACS) 的细胞核分离方法。我们通过将非 FACS 单核 RNA 测序 (snRNA-seq) 方法与基于从同一批叶子材料中提取的原生质体的 scRNA-seq 结果进行比较,验证了成熟拟南芥植物组织中无 FACS 单核 RNA 测序(snRNA-seq)方法的稳健性。测序结果证明了 snRNA-seq 数据的高质量,以及它在细胞类型分类和标记基因识别中的实用性。这种方法还显示出几个优点,包括能够使用冷冻样品、减少悬浮液制备时间、减少有偏差的细胞覆盖和解离诱导的转录伪影。令人惊讶的是,snRNA-seq 检测到了两个表皮路面细胞簇,尽管 scRNA-seq 只有一个。此外,基于簇特异性表达基因表达模式的差异,我们推测这两个表皮细胞代表上表皮和下表皮。综上所述,本研究推进了snRNA-seq在拟南芥叶片中的应用,证实了snRNA-seq在植物研究中的优势。
Data type: Raw sequence reads; Other
Sample scope: Other
Submitter: 赵彩耀; 深圳华大生命科学研究院
Literatures
- PMID: 36400127
Release date: 2023-01-04
Last updated: 2021-12-13
DOI: 10.26036/CNP0002469
Data size: 661.58GB
